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一些保護劑在蛋白和多肽的凍干制劑中的應用

點擊次數(shù):4116    更新時間:2016-08-12

   一些保護劑在蛋白和多肽的凍干制劑中的應用,例如甘露醇是一種多羥基化合物,不僅可作為優(yōu)良的骨架劑使用,也能兼作滲透性調(diào)節(jié)劑及蛋白質(zhì)的凍干保護劑。

   氨基酸也是一種常見的蛋白質(zhì)保護劑,研究發(fā)現(xiàn),兩種低濃度的氨基酸(谷氨酸和精氨酸)對PEG—rhlFNot2b的凍干保護作用非常顯著,可能是因為:①二者一個是酸陛氨基酸,一個是堿性氨基酸,加人后使制劑具有了更好的緩沖能力,提高了蛋白質(zhì)在凍干過程中的穩(wěn)定性;②氨基酸的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度相對高于非氨基酸緩沖劑,因此可能對凍干制劑的穩(wěn)定性起到了一定作用;③ 氨基酸的另一種可能的保護機制是在冷凍過程中與蛋白共濃縮,從而起到了稀釋和保護蛋白的作用;④在冷凍和凍干過程中,兩性的氨基酸分子與蛋白分子之間發(fā)生特異的相互作用,保護蛋白不變性。

    糖是zui常見、使用zui廣泛的一類凍干保護劑,是蛋白質(zhì)的非特異性穩(wěn)定劑,在凍干機?干燥的各個階段均能對蛋白質(zhì)起到一定的保護作用。蔗糖和海藻糖都是二糖,其中蔗糖化學性質(zhì)穩(wěn)定,多呈無定型結構,對阻止蛋白質(zhì)二級結構改變以及凍干過程中及儲存期內(nèi)蛋白質(zhì)的伸展和聚集起顯著作用。蔗糖也有一個相對較高的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度,使其在冷凍狀態(tài)下與蛋白質(zhì)共濃縮,起到了稀釋蛋白質(zhì)的作用,從而防止了聚合,并且維持蛋白分子的結構。另外蔗糖、海藻糖以及甘露醇上的羥基能替代部分結構水,與蛋白中的羰基和氨基結合形成的氫鍵使其在缺水的條件下仍能保持原有結構,而不喪失活性。蔗糖具有比其他多元醇更*的水置換特性。海藻糖的作用與蔗糖相似,但比蔗糖具有更高的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度和更低的引濕性,且更不具有還原性。 

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